Técnicas de identificación de bacterias

Identificación de bacterias

Tienes bacterias misteriosas que quieres identificar. Hay varias formas de probar estas bacterias para descubrir su identidad. Algunas personas clasifican las bacterias por forma, mientras que otras realizan una tinción que hace que las bacterias adquieran un color específico en función de la estructura de su pared celular. Esta lección analizará las pruebas menos conocidas que se utilizan para identificar bacterias. ¡Pero estamos perdiendo el tiempo! ¡Averigüemos qué es esto lo antes posible!

Bacterias misteriosas

Aeróbico frente a anaeróbico

La primera prueba en la que nos centraremos es si la muestra de bacterias desconocidas es aeróbica o anaeróbica. Para esta prueba, debemos colocar la bacteria en un tubo de ensayo que contenga un caldo nutritivo (que es alimento para bacterias) y luego observar dónde crece en el tubo. Antes de colocar nuestras bacterias misteriosas en un tubo de ensayo, eche un vistazo a la imagen y la lista con viñetas que explica lo que significa cada hallazgo.

• Si las bacterias son aerobios obligados , necesitan oxígeno. Eche un vistazo al tubo de ensayo 1 y verá que las únicas bacterias que sobrevivieron fueron las que estaban cerca de la parte superior del tubo, donde podían obtener oxígeno.
• Otras veces, las bacterias morirán si se exponen al oxígeno. Estos se denominan anaerobios obligados . El tubo de ensayo 2 ilustra este grupo, con todas las bacterias expuestas a cualquier tipo de oxígeno muriendo.
• Los anaerobios facultativos pueden sobrevivir con o sin oxígeno, y estos se ven en el tubo de ensayo 3. La razón por la que hay más en la parte superior es porque pueden usar oxígeno. A menudo, esto es más eficiente para ellos, por lo que crecerán más.
• Los microaerófilos no pueden manejar altas concentraciones de oxígeno, pero necesitan algo. Están representados por el tubo de ensayo 4.
• Finalmente, las bacterias aerotolerantes pueden sobrevivir en presencia de oxígeno, pero no lo utilicen. Están en probeta 5.

Colocamos nuestra bacteria misteriosa en un tubo de ensayo y notamos que los resultados son similares a los del tubo de ensayo 3, por lo que sabemos que nuestra bacteria misteriosa es un anaerobio facultativo. Bien bien. Nos estamos acercando a identificarlo.

Agar cromogénico

La siguiente prueba que usaremos consiste en cultivar la bacteria misteriosa en un agar especial llamado agar cromogénico , que cambia de color según las bacterias que crecen. A medida que las bacterias consumen el agar, se liberan sustancias. Estas sustancias provocan un cambio de color en el agar. Dependiendo de la procedencia del agar, se utilizan diferentes códigos de color. Por ejemplo, el azul de una empresa puede significar algo diferente al azul de otra empresa. Nuestras bacterias misteriosas provocaron un cambio de color rosa oscuro. Miremos la tabla para ver qué podría significar eso.

Hmmmm. Parece que podría ser Escherichia coli o Staphylococcus saprophyticus y, dado que ambos son anaerobios facultativos, tendremos que seguir probando.

Patrones de resistencia intrínseca

La tercera prueba que realizaremos clasifica las bacterias en función de su resistencia a determinadas sustancias y se denomina patrones de resistencia intrínseca . En otras palabras, las bacterias están expuestas a diferentes materiales, como antibióticos. Si son resistentes, entonces el material no les afecta. Los científicos pueden agrupar las bacterias según los materiales a los que son resistentes. Los resultados indican que las bacterias misteriosas eran resistentes al antibiótico amoxicilina. Desafortunadamente, esto no es concluyente, ya que algunas cepas de Escherichia coli y Staphylococcus saprophyticus pueden ser resistentes a ese antibiótico.

MALDI-TOF

Una prueba más, ¡ojalá nos dé respuestas! MALDI-TOF son las siglas de Matrix Assisted Laser Desorption / Ionization Time of Flight Spectrometry (sí, sale directo de la lengua). En esta prueba, se coloca una muestra al vacío y se dispara con un láser. Esto convierte la muestra en iones (partículas cargadas), que se colocan en un tubo y se aceleran. Las partículas se separarán unas de otras en función de sus cargas y tamaños. Las partículas se miden y registran. Por ejemplo, una medida es cuánto tardan las partículas en llegar al final del tubo. La información recopilada se puede utilizar para identificar las bacterias comparando los datos con los datos conocidos.

Un gráfico producido a partir de la prueba MALDI-TOF

Cuando se comparan los gráficos de nuestras bacterias misteriosas con el gráfico conocido de Escherichia coli , hay una coincidencia. ¡Por fin tenemos las respuestas! Entonces, nuestras bacterias misteriosas son Escherichia coli .

Resumen de la lección

A menudo, los científicos observan la forma de las bacterias o de qué color se vuelven cuando se tiñen para clasificarlas e identificarlas. Examinamos otros métodos. Repasemos brevemente estos métodos. El primer método que analizamos fue la tolerancia de las bacterias al oxígeno. Eche un vistazo a la mesa.

También analizamos el agar cromogénico , que es un nutriente que alimenta a las bacterias. El agar cambia de color según las bacterias presentes. A continuación, se colocaron bacterias en diferentes sustancias para ver si esas sustancias impactaban su crecimiento en lo que se llama patrones de resistencia intrínseca . Si las bacterias fueran resistentes a la sustancia, los científicos podrían clasificarlas. Finalmente, lo más complicado fue usar una técnica llamada MALDI-TOF donde las bacterias son ionizadas y disparadas a través de un tubo. Luego se crea un gráfico basado en los datos recopilados (como masa y carga). El gráfico se puede comparar con otros gráficos para ver si las bacterias misteriosas coinciden.

Rodrigo Ricardo Editor y fundador