Detección de Anticuerpos: Definición, métodos y aplicaciones

Publicado el 13 julio, 2024 por Rodrigo Ricardo

Una taza de Morning Joe

Lo primero que hace Abby cuando llega al laboratorio todas las mañanas es preparar una taza de café. Ella no podría vivir sin él. Mientras vertía el agua en la cafetera, pensó en cómo el filtro atrapa los posos mientras deja que el agua corra a través de la cafetera. El resultado fue una taza de café perfecta. “Un concepto tan simple”, pensó, “¡si tan solo los procedimientos de las pruebas de laboratorio fueran tan fáciles!”

Anticuerpos

Los procedimientos de detección de anticuerpos realizados en el laboratorio pueden no ser tan fáciles como preparar su café de la mañana, pero los matices involucrados en esas pruebas de laboratorio salvan vidas. Los anticuerpos sanguíneos son formados por el sistema inmunitario en respuesta a antígenos (sustancias extrañas) en la superficie de las células sanguíneas. Se espera que algunos anticuerpos, como los anticuerpos A y B, estén presentes en la sangre y se usan para determinar su tipo de sangre. Se espera que estos anticuerpos estén allí y no sean el objetivo de la detección de anticuerpos. En cambio, la detección de anticuerpos se usa para detectar anticuerpos inesperados que podrían causarle daño si alguna vez recibe productos sanguíneos o se somete a una transfusión.

Prueba de tubo

La última vez que visitó un hospital, probablemente haya visto algunos tubos con tapas de varios colores transportados por enfermeras o personal de tecnología médica. Estos se utilizan para extraer muestras de sangre del paciente y luego se llevan al laboratorio para su análisis. Aunque se considera la forma antigua de detectar anticuerpos, la prueba de tubo todavía se usa ampliamente. Este método probado y verdadero es relativamente barato y produce resultados rápidos. En este método se utilizan células de detección, células sanguíneas tipo O que contienen antígenos específicos, y se analizan frente al suero del propio paciente. En las pruebas de tubo, las células se centrifugan y luego se incuban a 37 grados centígrados. A veces, mejoras como LISS(solución de baja fuerza iónica) se agregan para promover la reactividad de los anticuerpos. Luego, se agrega globulina antihumana y puede revisar las muestras para ver si hay aglutinación , la formación de grumos de células.

Las pruebas en tubo se consideran positivas cuando se produce aglutinación o hemólisis (rotura o destrucción). Se clasifican según la presencia de estas características. Debe leer los resultados de la prueba inmediatamente después de sacarlos de la centrífuga. Una reacción positiva en cualquiera de las tres fases justifica más pruebas para identificar qué anticuerpos están presentes. Las pruebas se consideran negativas en ausencia de aglutinación y/o hemólisis.

Pruebas de microcolumna de gel

Otro tipo de detección de anticuerpos que se utiliza hoy en día es la prueba de microcolumna en gel . Para este tipo de prueba, utilizará columnas de gel poroso impregnadas con un reactivo antiglobulina que atrapa los anticuerpos unidos a los glóbulos rojos. Hay que mezclar el suero del paciente con reactivos y añadir un potenciador como LISS. Se dejan incubar y luego se colocan en la centrífuga. Una prueba reactiva, una prueba positiva para anticuerpos, ocurre cuando ocurre la aglutinación y las células permanecen en la parte superior de la columna de gel. Una prueba se considera negativa para anticuerpos cuando no ocurre aglutinación y las células se mueven libremente al fondo de la columna de gel.

Al igual que el filtro de café que atrapa los granos pero deja pasar el agua, la columna de gel atrapa las células aglutinadas y las células no reactivas fluyen hacia el fondo de la columna.

Una ventaja de la prueba de gel es que solo necesita usar pequeños volúmenes de suero y reactivo para realizar la prueba. Otra es que los resultados son estables, por lo que otro revisor puede ver los resultados de la prueba de detección de un paciente incluso en un momento posterior.

SPRCA

El tercer tipo de detección de anticuerpos que puede usar mientras realiza las pruebas se llama ensayo de adherencia de glóbulos rojos en fase sólida (SPRCA) . Este es un método sin tubo que utiliza placas de microtitulación. Las placas de microtitulación son placas planas con numerosos pocillos que actúan como tubos de ensayo. Para usar este tipo de prueba, deberá agregar el plasma del paciente y un potenciador como LISS al pozo y dejar que se incuben. Si hay anticuerpos presentes, se unirán a los antígenos en el revestimiento del pocillo, pero los anticuerpos no unidos se eliminarán. Luego se centrifugan y se leen. Una capa uniforme de glóbulos rojos indicadores en el fondo del pocillo representa un resultado positivo.

La prueba de fase sólida es sensible, menos subjetiva en términos de interpretación y lo suficientemente estable como para que otro revisor pueda leer los resultados en un momento posterior. Además, solo necesitará pequeñas cantidades tanto de la muestra como del reactivo para realizar la prueba.

Resumen de la lección

Los anticuerpos sanguíneos se forman en respuesta a los antígenos que se encuentran en la superficie de las células sanguíneas. Los anticuerpos A y B se producen de forma natural y, por lo tanto, se esperan. El objetivo de la detección de anticuerpos es que usted detecte anticuerpos inesperados que tienen el potencial de causar reacciones clínicamente significativas en el receptor cuando se intercambian productos sanguíneos. Las células de detección son células sanguíneas tipo O que contienen un perfil de antígeno específico.

La prueba de tubo, la prueba de microcolumna de gel y la SPRCA son los tres métodos que puede usar al realizar la detección de anticuerpos. La prueba de tubo ha sido utilizada por técnicos de laboratorio médico durante mucho tiempo y tiene las ventajas de ser económica y proporcionar resultados rápidos. Este método utiliza células de cribado. Sin embargo, la prueba de microcolumna de gel y la SPRCA también están demostrando ser beneficiosas. Ambos solo requerirán que use pequeñas cantidades de suero y reactivo para realizar la prueba, y ambos también permanecen estables durante un período de tiempo, lo que permite que otro revisor examine los resultados que obtuvo incluso en un momento posterior.

Puede usar potenciadores como LISS en los tres métodos de detección para promover la reactividad de los anticuerpos. Se producirá aglutinación o hemólisis cuando los anticuerpos reaccionen con los antígenos, lo que indica un resultado positivo. Luego calificará los resultados de acuerdo con la apariencia y las características de estas células aglutinadas.

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