Recolección y análisis de piel, tejidos blandos y huesos
Propósito del análisis de muestras
Los especímenes humanos se pueden recolectar para diagnosticar enfermedades o para investigar el tratamiento de ciertas enfermedades. Hay una variedad de formas en que se recolectan y analizan especímenes humanos; con frecuencia se evalúan microscópicamente, pero también se pueden usar para extraer ADN. A menudo, el método de recopilación está determinado por el tipo de análisis planificado.
Recolección y análisis de huesos
La razón principal por la que se recolecta el hueso es para el análisis de ADN, ya que los dientes o el hueso se pueden triturar hasta convertirlos en un polvo fino, que es esencialmente una colección de las células que los componen. A partir de estas células, se puede extraer y analizar el ADN. El hueso se recolecta con menos frecuencia que la piel y el tejido, ya que estos últimos son más accesibles. Si existe una sospecha de enfermedad de un hueso, normalmente se agotan otras pruebas de diagnóstico antes de la recolección de la muestra.
Idealmente, el hueso debe recolectarse utilizando técnicas estériles. Estos implican el uso de un método para esterilizar instrumentos como bisturíes y cortadores de huesos, limpiar la piel circundante con un antiséptico y evitar la contaminación cruzada con superficies sucias. Sin embargo, las circunstancias bajo las cuales se analiza el ADN del hueso no siempre permiten la recolección estéril. Por ejemplo, los huesos de restos no identificados significan que el entorno circundante no podría haber permitido una recolección estéril.
Recolección y análisis de piel
Existen diferentes formas de recolectar y analizar muestras de piel. A menudo, la piel se retiene para incrustarse en parafina, una sustancia cerosa que luego se puede cortar en rodajas finas para su análisis. En este caso, se extrae de la fuente una muestra de piel de no más de 3 mm de espesor y se coloca sobre un trozo de papel de filtro para mantenerlo plano. La muestra aplanada facilita el montaje en un portaobjetos para su examen. Luego, el papel se coloca en una solución de formalina tamponada neutra (NBF) para su conservación hasta que se pueda incrustar en parafina, donde se puede guardar durante años.
La piel también se puede congelar instantáneamente después de la recolección guardando la muestra de piel en un criotubo y sumergiéndola en nitrógeno líquido, una combinación de alcohol y hielo seco. Tanto la congelación instantánea como la inclusión en parafina producen muestras similares para su evaluación. El método que se usa generalmente está determinado por los procedimientos operativos estándar de quien sea que esté procesando los tejidos.
La piel retenida a menudo se analiza histológicamente, lo que significa que se monta en portaobjetos de vidrio y se observa al microscopio. Sin embargo, la piel recolectada también se puede analizar en busca de ADN y ARN a nivel molecular. El método de recolección del análisis de ADN de la piel suele ser la recolección de criotubos con congelación, pero también se pueden usar muestras incrustadas en parafina. Cualquier muestra de piel retenida para el análisis de ADN se recolecta utilizando técnicas asépticas para mantener la esterilidad de la muestra.
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Recolección y análisis de tejidos blandos
El tejido blando se puede recolectar de manera similar a la piel conservándolo en una solución de formalina tamponada neutra (NBF) y luego incrustándolo en parafina. Sin embargo, las muestras de tejido blando a menudo se conservan en tubos con un pequeño volumen de solución salina para mantener la humedad. Luego, este tubo se analiza para una variedad de pruebas, incluido el ADN o el examen histológico.
Resumen de la lección
Los especímenes humanos se pueden recolectar de varias maneras y analizar de múltiples maneras. Tanto las muestras de piel como las de tejido se pueden recolectar a través de la preservación con solución de formalina tamponada neutra (NBF) seguida de su inclusión en parafina (una sustancia cerosa) o mediante congelación instantánea con nitrógeno líquido, una combinación de alcohol y hielo seco. La piel también puede conservarse en un tubo estéril con solución salina para mantener la humedad, refrigerarse y analizarse el mismo día. El análisis de estas muestras puede variar, pero a menudo implica un examen histológico, lo que significa que se montan en portaobjetos de vidrio y se observan al microscopio. Sin embargo, la piel también se puede analizar en busca de ADN y ARN a nivel molecular.