¿Qué es la monitorización terapéutica de fármacos?
La monitorización terapéutica de medicamentos (TDM) garantiza que los pacientes que toman medicamentos con fines terapéuticos reciban una dosis no tóxica adecuada para la afección que se está tratando. TDM se puede utilizar como método para ajustar las dosis de medicación durante el curso del tratamiento o simplemente como una forma de mantener los niveles en sangre dentro de un rango objetivo. No todos los medicamentos requieren TDM, pero algunos son más difíciles de dosificar que otros y pueden causar efectos secundarios peligrosos si no se mantienen dentro del rango de dosificación correcto. La mayoría de las pruebas TDM se realizan mediante métodos cromatográficos o mediante inmunoensayo.
¿Qué es el inmunoensayo?
Un inmunoensayo es un tipo de método analítico de laboratorio en el que la cantidad de un analito (la sustancia cuya cantidad queremos medir en una muestra) se determina midiendo el resultado de una reacción entre un antígeno y un anticuerpo. Básicamente, en un inmunoensayo, se colocan anticuerpos específicos en una cámara de reacción de algún tipo y luego se agregan a la cámara tanto la muestra a analizar como otra cantidad conocida de analito marcado. Luego se analiza la actividad del analito marcado, que proporciona algún tipo de señal mensurable (generalmente óptica). Esto proporciona la información deseada: la cantidad de analito de interés en la muestra. I
¿Por qué se utilizan los inmunoensayos en la monitorización terapéutica de fármacos?
Los inmunoensayos son formas convenientes y eficientes de realizar el seguimiento de fármacos terapéuticos. Son precisos porque se basan en la especificidad de los diversos anticuerpos (y a veces antígenos) utilizados en las reacciones de unión y debido a la alta sensibilidad del análisis. No se necesita ningún tratamiento previo para un inmunoensayo y solo se necesitan pequeñas cantidades del analito de la muestra. Los inmunoensayos también se pueden automatizar fácilmente.
Cómo se utilizan los inmunoensayos en la monitorización de fármacos terapéuticos
En TDM, los inmunoensayos están automatizados y, a partir de 2022, se utilizan más de 25 tipos de configuraciones de pruebas de inmunoensayo en los laboratorios analíticos. Estos sistemas tienen sus propios métodos de calibración y pueden almacenar los reactivos necesarios. Los dos tipos principales de formatos utilizados para el inmunoensayo son los de competición y los no competitivos (o sándwich). Para TDM, generalmente se elige el método de competencia porque los analitos de muestra de TDM generalmente tienen un peso molecular apropiadamente pequeño.
El formato de la competencia
En el formato de competición de inmunoensayo, se proporciona un tipo específico de anticuerpo en la cámara de reacción. Luego se añaden el analito de muestra y el analito de señal marcado, y ambos compiten por sitios de unión limitados en estos anticuerpos. Como resultado, cuanto mayor sea la concentración del analito de la muestra, menos sitios de unión de anticuerpos estarán disponibles para el analito marcado. Como tal, para el formato de competencia, la concentración del analito de la muestra es inversamente proporcional a la señal producida por el analito marcado.
Técnicas de monitorización terapéutica de fármacos para psicología
Homogéneo o Heterogéneo
Los inmunoensayos también pueden clasificarse como homogéneos y heterogéneos. En un inmunoensayo homogéneo, la reacción se lleva a cabo simplemente mezclando el anticuerpo, el analito marcado y el analito de muestra, todos juntos a la vez y luego tomando una medición. Al igual que en el formato de competición, esta técnica es más apropiada para analitos de muestras con pesos moleculares pequeños. El método heterogéneo requiere muchos más pasos y se utiliza para muestras de pesos moleculares mayores.
Tipos de inmunoensayos utilizados para TDM
Existen varios tipos de inmunoensayos que se utilizan comúnmente para realizar TDM. El método elegido depende de varios factores, tales como:
- Tipo de muestra: los diferentes tipos de inmunoensayos pueden tener diferentes niveles de compatibilidad con diferentes tipos de muestras de fluidos corporales, como plasma, suero, orina o saliva.
- Analito objetivo: el inmunoensayo debe elegirse de manera que pueda detectar el tipo de molécula objetivo, como una proteína, un patógeno o un ácido nucleico.
- Sensibilidad y especificidad: los diferentes tipos de inmunoensayos y analitos tienen diferentes requisitos de sensibilidad y especificidad.
Técnica de inmunoensayo multiplicado por enzimas
En la técnica de inmunoensayo multiplicado por enzimas (EMIT), el analito de la muestra compite con un analito marcado con una enzima. Cuanto mayor sea la concentración del analito de la muestra, menos sitios de unión de anticuerpos estarán disponibles para el analito marcado con enzima. Como resultado, se encuentra más analito enzimático marcado libre, lo que hace que la solución de reacción cambie de color.
Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) se utiliza a menudo para diagnosticar diversas enfermedades infecciosas, así como para el seguimiento de fármacos terapéuticos. Algunas pruebas ELISA se utilizan para diversos estudios farmacocinéticos, cuyo objetivo es determinar cómo el cuerpo metaboliza un fármaco. También se puede utilizar una prueba ELISA para diseñar un programa de dosificación eficaz y no tóxico para antibióticos fuertes.
Inmunoensayo de polarización de fluorescencia
En el inmunoensayo de polarización de fluorescencia (FPIA), el analito de la muestra compite con un fármaco marcado con fluorescencia por los sitios de unión. Luego, la mezcla de reacción se expone a una luz polarizada plana, que vibra en un solo plano y excita la mezcla de reacción. Luego, el fármaco etiquetado regresa a un estado de menor energía. Al hacerlo, emite luz, que puede medirse como indicador de la cantidad de analito de la muestra.
Tipos de Medicamentos Terapéuticos
Resumen de la lección
La monitorización terapéutica de medicamentos (TDM) garantiza que los pacientes que toman medicamentos reciban una dosis adecuada y no tóxica dentro de un rango terapéutico. Esto a menudo se hace mediante inmunoensayo, un método en el que la cantidad de un analito se determina midiendo el resultado de la unión de un antígeno y un anticuerpo. Dos métodos de inmunoensayo que se utilizan a menudo en TDM son el formato de competencia, en el que el analito de la muestra y un analito de señal marcado compiten por los sitios de unión en un anticuerpo específico, y el inmunoensayo homogéneo, que se realiza simplemente mezclando todo en la cámara de reacción.. Ambos métodos son favorables para las moléculas de analito más pequeñas de TDM.
El método TDM elegido depende de varios factores, como:
- Tipo de muestra: plasma, suero, orina, saliva.
- Analito objetivo: proteína, patógeno, ácido nucleico
- Sensibilidad y especificidad
Los tipos de inmunoensayos incluyen:
- Técnica de inmunoensayo multiplicado por enzimas (EMIT): el analito competidor se marca con una enzima
- Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA): muestra cómo el cuerpo metaboliza un fármaco
- Inmunoensayo de polarización de fluorescencia (FPIA): el analito competidor se marca con fluorescencia y la mezcla de reacción se expone a luz polarizada.
Los inmunoensayos se automatizan fácilmente y son rentables.
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