Prueba de rojo de metilo para bacterias: procedimiento y principio

Publicado el 17 septiembre, 2020 por Rodrigo Ricardo

E. coli

Si alguna vez ha tenido gripe estomacal, probablemente sepa que no es una experiencia agradable. Pero si estuviera infectado con E-coli, sería una experiencia particularmente desagradable, ya que causa diarrea extrema, vómitos, calambres y heces con sangre. La E-coli puede provocar la muerte, especialmente en niños pequeños, ancianos, mujeres embarazadas y personas con sistemas inmunitarios debilitados.

Los fabricantes de alimentos a menudo prueban los alimentos para asegurarse de que no contengan E-coli. Una de las pruebas que se pueden realizar es la prueba del rojo de metilo. La prueba del rojo de metilo analiza las bacterias que realizan la fermentación ácida mixta de la glucosa. Dado que E-coli pertenece a la familia de bacterias que realiza la fermentación ácida mixta de glucosa, puede identificarse mediante esta prueba.

Principios de la prueba del rojo de metilo

Cuando algunos tipos de bacterias, como E-coli, entran en contacto con la glucosa, las bacterias utilizan la glucosa como fuente de energía. El proceso de descomposición de la glucosa para obtener energía fermentará la glucosa y formará ácido acético, ácido láctico y ácido succínico.

Las grandes cantidades de ácido producidas disminuyen considerablemente el pH de una mezcla por debajo de 4,4. Este cambio de pH se puede ver con un indicador. El rojo de metilo se vuelve rojo a un pH por debajo de 4,4, pero es amarillo a un pH más alto.


A un pH por debajo de 4,4, el rojo de metilo es un color rojo.
A un pH superior a 4,4, el rojo de metilo es de color amarillo.
Colores indicadores rojo de metilo

Procedimientos de prueba de rojo de metilo

Para realizar la prueba, primero se prepara un tubo de ensayo con caldo MR-VP. El caldo MR-VP es caldo de rojo de metilo-Voges-Proskauer; contiene glucosa, peptona y un tampón. El tampón se incluye para garantizar que una muestra pueda producir suficiente ácido no solo para reducir el pH, sino también para superar el tampón. La peptona se incluye simplemente porque se trata de un caldo multifuncional que también se puede utilizar para las pruebas de Voges-Proskauer al mismo tiempo.

Este tubo de ensayo de caldo se trata térmicamente para garantizar que comience limpio. Luego, se inocula con la muestra en cuestión. Luego se incuba durante 2-4 días a 35 grados centígrados. Se incuba a 35 grados Celsius porque esta es la temperatura ideal para que crezca E-coli, y si hay E-coli en la muestra, queremos asegurarnos de que realmente podamos verla crecer.


El caldo MR-VP se inocula con la muestra en un tubo de ensayo.
Tubos de ensayo

Luego, se agregan unas gotas del indicador rojo de metilo al tubo de ensayo. Si hay presencia de E-coli (u otra bacteria de fermentación ácida mixta), en unos minutos la solución se volverá roja, lo que indica una prueba positiva. Si no hay presentes bacterias de fermentación ácida mixta, la solución será amarilla.

En situaciones en las que estamos probando E-coli, si obtenemos una prueba positiva, tendremos que hacer pruebas adicionales para ver si realmente estaba presente E-coli u otra bacteria de fermentación ácida mixta, pero esto daría una buena inicial prueba para determinar si E-coli está presente.

Resumen de la lección

La E-coli es una peligrosa bacteria transmitida por los alimentos que podría provocar la muerte. Para realizar la prueba de E-coli, se puede realizar una prueba de rojo de metilo . Esta prueba indica la presencia de bacterias de fermentación ácida mixta (como E-coli) cuando la adición de ácidos de la fermentación mixta de glucosa reduce el pH de la mezcla y el indicador rojo de metilo vuelve rojo el caldo.

Para realizar la prueba, se inocula con la muestra un caldo MR-VP que contiene peptona, glucosa y un tampón. Después de la incubación, se agrega el indicador rojo de metilo. Si se pone rojo, es una prueba positiva; si es amarillo, entonces es una prueba negativa.

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