Propósito de la cromatografía de adsorción
En la parte posterior de la mayoría de los paquetes de medicamentos, verá una lista de instrucciones. Algunas de estas instrucciones incluyen la frecuencia con la que debe tomar el medicamento y la dosis máxima. ¿Cómo se determinan estos tiempos y dosis? Parte del proceso consiste en determinar la concentración del fármaco en su sistema después de cierto tiempo. La concentración de los fármacos en su sistema se puede determinar mediante cromatografía de adsorción.
La cromatografía de adsorción tiene muchas aplicaciones. Generalmente, se utiliza para determinar la concentración de un compuesto (o su pureza), separar una mezcla en componentes individuales e identificar qué hay en una mezcla. Hay tres tipos principales de cromatografía de adsorción: columna, capa fina y gas-sólido.
Cromatografía de adsorción en columna
La cromatografía de adsorción en columna utiliza una columna empaquetada con la fase estacionaria sólida, un líquido (la fase móvil) pasa a través de esta columna y moléculas específicas se adsorberán al sólido. Algunos componentes se adsorberán más fácilmente (o más fuerte) que otros componentes. Los compuestos que absorben más fuerte formarán una línea primero, en la parte superior de la columna. Los compuestos que absorben más débilmente formarán una línea hacia la parte inferior de la columna. Los compuestos que no se adsorben en absoluto simplemente pasarán por toda la columna y se acumularán en un vaso de precipitados en la parte inferior.
A continuación, se añaden disolventes adicionales a la columna, uno a la vez. El primer disolvente puede romper la interacción más débil entre la fase móvil y la estacionaria, llevando ese compuesto al vaso de recolección. Se agregan solventes más fuertes y fuertes hasta que todos los compuestos se hayan eluido (pasado) por la columna.
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Las pruebas de drogas se pueden realizar mediante cromatografía de adsorción en columna. La orina, u otras muestras corporales, se pasan a través de la columna, donde el pH alto de la orina hace que salga primero, seguida de otras sustancias. Las otras sustancias que se eluyen se pueden analizar para ver si hay algún fármaco presente. Lo bueno de este tipo de cromatografía es que las sustancias separadas se pueden utilizar para más pruebas.
Cromatografía de capa fina
La cromatografía de capa fina (TLC) utiliza un trozo de vidrio (u otra sustancia) con una capa fina de un sólido como sílice o alúmina. El método detrás de cómo funciona TLC es muy similar a cómo funciona la columna. Los compuestos que tienen una interacción fuerte con el sólido no viajarán muy lejos a lo largo de la placa, mientras que los compuestos con una interacción débil viajarán más a lo largo de la placa.
Para utilizar las placas de TLC, primero necesitamos tener una muestra conocida y probar qué tan lejos viajarán los componentes de esa muestra en la placa de TLC. Esto se llama referencia o estándar. Luego podemos comparar nuestras muestras desconocidas con la placa de referencia. Si las manchas en la muestra desconocida viajaron a las mismas distancias que la muestra conocida, entonces son los mismos compuestos en las muestras.
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La TLC es particularmente útil para comparar muestras porque podemos ver fácilmente si dos muestras son iguales. El mayor beneficio de TLC es que no requiere mucho espacio ni equipo. Para probar la pureza de su agua potable, los científicos pueden tomar una muestra y colocarla en la placa de TLC. Si los valores de Rf (qué tan lejos viaja) son los mismos que para el agua limpia, entonces el agua está limpia, pero si hay un valor de Rf que es diferente, el agua está contaminada.
Cromatografía gas-sólido
La cromatografía de gas-sólido es diferente porque utiliza un gas en lugar de un líquido como fase móvil, que puede adsorberse en un sólido. Para utilizar este método, la fase sólida se recubre en el interior de una columna muy fina. Esta columna se mete en un horno. A menudo, una sustancia llamada tierra de diatomeas se utiliza como fase sólida (estacionaria).
La fase móvil, o la muestra que se está probando, debe ser un gas para que este método funcione. No es necesario que sea un gas a temperatura ambiente, pero dado que la columna está en un horno, simplemente debe estar en estado gaseoso a la temperatura más alta del horno. A medida que los gases se eluyen de esta columna, se pueden identificar midiendo la conductividad térmica o la ionización de la llama del gas. De esta forma, los compuestos se pueden separar e identificar en una sola prueba. Es una prueba muy sensible y puede identificar incluso pequeños cambios entre gases a medida que eluyen fuera de la columna.
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La cromatografía de gas-sólido se usa a menudo para medir qué tan concentrados están los medicamentos en el cuerpo. El medicamento se administrará al paciente y, a intervalos variables, se tomarán muestras del paciente. Estas muestras se pasan por la columna de cromatografía y se medirán los diferentes gases eluidos. El medicamento en sí y sus metabolitos (en qué se descompone) se miden a lo largo del tiempo para ver qué tan concentrado está.
Resumen de la lección
Hay tres tipos principales de cromatografía de adsorción:
- Cromatografía de adsorción en columna
- Cromatografía de capa fina (TLC)
- Cromatografía gas-sólido
La cromatografía de adsorción en columna es útil porque la muestra líquida se puede recolectar y analizar más, se puede usar para determinar si alguien tiene drogas ilícitas en su sistema. La TLC es útil porque dos muestras se pueden comparar fácilmente entre sí sin una gran cantidad de equipos costosos; se puede usar para determinar si el agua está limpia. La cromatografía gas-sólido es útil porque separa los componentes de la muestra y los identifica a todos en uno, a menudo se utiliza para determinar el tiempo de eficacia de los medicamentos.
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