Prueba de frotis de sangre: procedimiento, tinción e interpretación

La prueba de frotis de sangre

El frotis de sangre juega un papel importante en el diagnóstico rápido de ciertas infecciones o enfermedades. Esta prueba usa una gota de sangre esparcida en un portaobjetos de vidrio de microscopio que luego se trata con una tinción de color y se examina con un microscopio. El frotis de sangre muestra una muestra de componentes sanguíneos que incluyen plaquetas, leucocitos (glóbulos blancos) y eritrocitos (glóbulos rojos) que están presentes en el plasma, la parte líquida de la sangre. Una prueba de frotis de sangre se usa generalmente como prueba de seguimiento después de que se mostraron resultados anormales en una prueba de hemograma completo (CBC). El frotis de sangre es una ayuda de diagnóstico vital.

Procedimiento

Se realiza una prueba de frotis de sangre obteniendo primero una muestra de sangre de 5 ml del paciente. Se debe informar al paciente sobre el procedimiento antes de tomar una muestra de su vena o, con menos frecuencia, de un capilar. La muestra de sangre se almacena en una botella que contiene un anticoagulante llamado ácido etilendiaminotetraacético (EDTA). Los anticoagulantes evitan que la sangre se coagule. Esta muestra se envía al laboratorio para su análisis dentro de las dos horas posteriores a la recolección.

La preparación del portaobjetos del microscopio la realiza personal capacitado, como un patólogo, un técnico de laboratorio médico, un hematólogo o un asistente de laboratorio. Este personal utiliza un portaobjetos de base, un portaobjetos para esparcir sangre y una pipeta o tubo capilar. El método de la cuña es la forma más común de preparar el portaobjetos para la prueba. Con este método, se coloca una gota mixta de sangre de 1 a 2 mm de diámetro en la línea central a aproximadamente 1/4 de pulgada del borde del portaobjetos del microscopio utilizando una pipeta o un tubo capilar. El portaobjetos que contiene la gota de sangre se llama portaobjetos base.

Se utiliza otro portaobjetos de microscopio llamado portaobjetos esparcidor. Esta diapositiva debe tener bordes astillados, junto con otro extremo liso. El lado del portaobjetos esparcidor con bordes astillados se coloca en el portaobjetos original (portaobjetos base) frente a la sangre y se mueve hacia atrás para tocar la sangre. Esto hace que la sangre se extienda a lo largo de la base del portaobjetos.

El frotis se realiza con el esparcidor inclinado en un ángulo de aproximadamente 30 ° con respecto a la sangre. El frotis debe cubrir dos tercios del portaobjetos base y debe tener un extremo emplumado. A continuación, se debe secar el frotis al aire. El extremo mate del portaobjetos debe etiquetarse con el nombre del paciente, el número de identificación y la fecha. A continuación, el frotis seco se fija con metanol o alcohol etílico y se tiñe.

El frotis se cubre con tinte durante aproximadamente diez minutos, luego se diluye con agua y se deja diez minutos adicionales para que las células se tiñen correctamente. Después de la aplicación del tinte, el portaobjetos se enjuaga con agua corriente. El portaobjetos debe limpiarse por debajo con un algodón para eliminar el exceso de mancha. Finalmente, el portaobjetos se coloca sobre una rejilla para que se seque.

Consejos para realizar pruebas perfectas

Es mejor seguir las instrucciones del procedimiento para obtener, crear y teñir un frotis de sangre. También es mejor crear un nuevo frotis si el procedimiento está comprometido que interpretar un frotis inadecuado. La calidad del frotis de sangre depende de una técnica adecuada y de la calidad de la tinción. Se deben seguir algunas pautas adicionales para crear el mejor frotis de sangre.

Se deben hacer al menos dos portaobjetos durante la prueba. Un frotis será demasiado delgado si el deslizador del esparcidor se mueve demasiado rápido o si el ángulo del esparcidor es menor de 30 °. Por el contrario, la mancha será demasiado gruesa si el esparcidor se mueve lentamente o si el ángulo es mayor de 30 °. Las gotas de sangre grandes pueden extender el frotis sobre una gran parte del portaobjetos base, mientras que una gota pequeña puede ser insuficiente para el frotis. La mancha necesita un tiempo adecuado con la muestra para evitar la tinción excesiva o insuficiente. Si una muestra está demasiado teñida, es posible que aparezcan restos en la muestra. Esto también puede suceder si la mancha no se lava lo suficiente con agua corriente.

Tinción

La tinción de Wright , también conocida como tinción de Romanowsky , es una mezcla de tintes ácidos y básicos que se utilizan para distinguir los componentes celulares. Las células sanguíneas se tiñen en su centro. Los reticulocitos son células sanguíneas inmaduras y se tiñen de un color azul más oscuro, mientras que los eritrocitos maduros se tiñen de un color azul más claro. La intensidad de la tinción varía según la concentración de la mancha y el tiempo de contacto de la muestra con la mancha.

Interpretación

Las principales tareas del frotis de sangre son el diagnóstico diferencial de anemia y trombocitopenia, así como la identificación y caracterización de algunos cánceres. Si los resultados de una prueba reciente han cambiado con respecto a pruebas anteriores, esto sugiere problemas en el desarrollo celular. Esta prueba también puede indicar problemas de circulación, infecciones y enfermedades genéticas. La distribución, el tamaño, la forma y el color de los glóbulos rojos y blancos, así como las plaquetas, deben evaluarse cuidadosamente.

Las anomalías en la forma de los glóbulos rojos pueden indicar anemia . Esta condición provoca una disminución en la capacidad de los glóbulos rojos para transportar oxígeno. Existen varios tipos de anemia. Si los glóbulos rojos son de color más claro, esto puede indicar que no tienen suficiente hemoglobina , que generalmente se une al oxígeno en la sangre. Esto también puede indicar anemia.

La anemia de células falciformes se puede demostrar por la forma falciforme anormal de los glóbulos rojos en una muestra. Las plaquetas y las células deben contarse en el frotis. Un número elevado de algunos leucocitos puede respaldar el diagnóstico de leucemia, mientras que un número bajo de plaquetas puede indicar trombocitopenia. Si los resultados del frotis de sangre son anormales, puede estar indicada una evaluación de la médula ósea del paciente.

Resumen de la lección

El frotis de sangre es una importante herramienta de diagnóstico para anemia, trombocitopenia, enfermedades genéticas y algunos cánceres, entre otros. Esta prueba debe ser realizada por profesionales de la salud capacitados. El procedimiento implica tomar una muestra de sangre, crear un frotis usando el método de cuña (más comúnmente) y luego aplicar una tinción. La tinción de Wright , también conocida como tinción de Romanowsky , es una mezcla de tintes ácidos y básicos que se utilizan para distinguir los componentes celulares.

Existen pautas estrictas que pueden proporcionar un frotis perfecto, que luego es analizado por un profesional médico. Las tinciones permiten ver fácilmente las características de las células de eritrocitos y leucocitos, como el color, la forma, el tamaño y la disposición de las células. Este análisis puede mostrar indicadores de muchos procesos patológicos, como anemia y trombocitopenia.